色谱,Vol.38Issue(9):-
DOI:10./SP.J...
张剑,张博,贺茂芳,韩禄,高东羽,刘春叶*
毛细管电泳法测定天麻素对乙酰胆碱酯酶活性的抑制阿尔茨海默症（AD）是引起中老年人痴呆最常见的疾病。目前治疗AD的药物主要为乙酰胆碱酯酶抑制剂（AChEI）。建立快速地从天然产物中筛选AChEI的方法，将对临床治疗AD产生积极的作用。该研究建立了一种简单可靠的AChEI筛选新方法。通过海美溴铵在毛细管内壁形成一段正电荷涂层，再经过离子吸附作用制备1.5cm长的乙酰胆碱酯酶（AChE）反应器。底物碘化乙酰硫代胆碱在0.MPa压力下进样10s，在微酶反应器中停留1min后采用毛细管电泳（CE）法对底物和酶解产物进行分离。天麻素是天麻的重要药效成分之一，对AChE具有抑制作用。该研究以天麻素为例，根据加入药物前后酶解产物峰面积的差异，完成天麻素对AChE活性的抑制能力的测定。结果表明，随着天麻素浓度的增加，产物峰面积逐渐减小，对AChE的活性抑制变大。该方法所建微酶反应器产物峰面积的RSD值小于5.3%，可连续使用次。当天麻素浓度为5.24μmol/L时，对AChE活性抑制率达到64.8%。根据加入不同浓度天麻素时的抑制率，测定出天麻素的IC50值为（2.26±0.14）μmol/L（R2=0.）。与传统紫外分光光度法所得结果（2.09±0.18）μmol/L吻合较好。固定化酶微反应器的活性变差时，可以洗脱掉固定在柱上的AChE，重复酶的固定化步骤即可完成再生。该方法简单、高效，运行成本低，柱上固定的AChE酶反应器稳定性较好，可重复使用，极大地提高了工作效率，未来有望应用于各类AChEI的高通量筛选，对AD药物的研发具有积极作用。
乙酰胆碱酯酶(AChE)是生物神经传导中的一种关键性酶。在胆碱能突触间,该酶能降解乙酰胆碱,终止神经递质对突触后膜的兴奋作用,保证神经信号在生物体内的正常传递。
阿尔茨海默症是引起中老年人痴呆最常见的疾病,AChE抑制剂(AChEI)是当前治疗该疾病的主要药物。AChEI的药理作用是抑制AChE的活性,从而维持神经系统中乙酰胆碱的正常水平。因此,AChEI的筛选研究受到了广泛